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試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟可從以下四個步驟進(jìn)行
點(diǎn)擊次數(shù):751 更新時間:2021-11-20
  ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用,那么這種試劑盒該如何使用呢?請看這里。
  一、重要的洗滌:
  不充分的洗滌會導(dǎo)致差異和高背景,從而帶來不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。有必要的話,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高,懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗滌次數(shù)。
  第二、關(guān)鍵的封閉:
  封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會。如果背景過高,懷疑封閉不充分,那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當(dāng)延長封閉時間。
  目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。使用的類型須取決于多個因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
  第三、抗體濃度須優(yōu)化:
  如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點(diǎn),切勿使用過多的一抗或二抗。
  第四、檢測試劑要適量:
  切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導(dǎo)致高背景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液。
  只有確保每一步操作都做到位,才會呈現(xiàn)理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以ELISA實(shí)驗(yàn)的每一步都很重要,我們在實(shí)驗(yàn)的時候切記不可以掉以輕心。

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