服務項目 | 終端報價 | 說明 | 實驗周期 |
SYBR Green染料法(單孔) | 80元/例/基因 | 包含引物設(shè)計合成、提取、逆轉(zhuǎn)錄、擴增.內(nèi)參免費(多樣本多基因可優(yōu)惠6-8折) | 1至2周內(nèi) |
SYBR Green染料法(兩重復) | 100元/例/基因 | ||
SYBR Green染料法(三重復) | 120元/例/基因 | ||
DNA提取 | 30元/樣本 | 包含濃度測定 | 1周內(nèi) |
RNA提取 | 35元/樣本 | ||
miRNA定量檢測(單孔) | 90元/例/基因 | 包含引物設(shè)計合成、提取、逆轉(zhuǎn)錄、擴增.內(nèi)參免費 | 1至2周內(nèi) |
lcnRNA定量檢測(單孔) | 90元/例/基因 | ||
siRNA合成 | 1000元/條 | 包含siRN及NC各一條 | 2至3周內(nèi) |
Taqman探針 | 1200元/條 | 包含探針一條及上下游引物一對 | 1至2周內(nèi) |
SNP檢測 | 100元/例/位點 | 包含DNA提取、擴增、測序 | 2至3周內(nèi) |
實驗意義
熒光定量PCR (Realtime fluorescence quantitative PCR, qPCR)也稱作實時熒光定量PCR。就是在PCR的擴增過程中,通過熒光的信號,對PCR的進程進行實時的定性、定量檢測, 后通過標準曲線對初始模板進行定量分析的方法。
檢測方式有SYBR Green染料法和Taqman探針法兩種方式。
探針法與染料法的優(yōu)缺點
1.探針法通過探針可以增加反應收集信號的特異性,只有探針結(jié)合的片段上發(fā)生擴增才能收集到信號,能夠用多重體系反應的方法,能夠預測和提前進行反應條件的優(yōu)化,缺點是要合成探針,成本高,周期長。
2.染料法經(jīng)濟實惠,可以做溶解曲線,分析全部PCR產(chǎn)物的TM值,缺點就是特異性沒有探針法好。
實驗標本收集及保存方法:
1:病理標本收集及保存:
1)冰凍切片:取下適當?shù)慕M織塊放于液氮保存;
2)石蠟切片:取下適當?shù)慕M織塊放于4%多聚甲醛保存;
3)細胞爬片:細胞爬片4%多聚甲醛固定30min,換PBS浸沒4℃保存。
2:分子生物學標本收集及保存:
1)新鮮組織:切割標本后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)石蠟標本:常溫保存;
3)全血標本:取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
4)體液標本:高速離心取沉淀;
5)細胞標本:細胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
3:蛋白質(zhì)實驗標本收集及保存:
1)新鮮組織:切割標本后放于液氮或者-80℃冰箱保存;
2)全血標本:取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管;
3)細胞標本:細胞加細胞裂解液充分裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
4:ELISA、放免、生化實驗標本收集及保存:
1)血清(血漿)樣本:取全血加入促凝管(抗凝管),2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,收集上清,液氮或者-80℃冰箱保存;
2)尿液樣本:樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液參照此實行;
3)細胞樣本:檢測分泌性的成份時,樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS稀釋細胞懸液,通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,收集上清同上;
4)組織樣本:切割標本后,稱取重量,用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆?/span>。
5:代謝組學標本收集:
1)尿液樣本:樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等參照此實行;
2)組織樣本切割標本后,稱取重量,用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆?/span>;
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