番紅O固綠染色實驗服務
番紅0固綠染色服務介紹
番紅0固綠染色(軟骨)在涉及關節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學研究中，常需要聯合使用多種染料以顯示其組織學結構。中,起源于上世紀60年代的番紅0 (safranin 0) -固綠(fast green)染色因可以直觀反映關節(jié)軟骨、軟骨下骨和骨組織結構而備受青睞。軟骨呈紅色，成骨呈綠色。
番紅0固綠染色實驗意義
番紅0固綠染色染色是針對軟骨及植物進行染色的方法，此方法簡易，節(jié)約時間、用具器皿及藥品，染色清晰。
實驗步驟:
1軟骨染色步驟:
①骨組織固定、脫鈣,制成石蠟切片。
②切片常規(guī)脫蠟至水。
③入新鮮配制的weigert染液染色。
④流水沖洗。
⑤酸性乙醇分化液分化。
⑥蒸餾水洗。
⑦在固綠染色液內浸染。
⑧蒸餾水洗。
⑨入番紅0染液內浸染。
（10）蒸餾水洗。
（11）用乙酸溶液洗滌切片，以便去除殘留的固綠，再用蒸餾水洗。
（12）分別用95%乙醇、無水乙醇脫水。
（13）二甲苯透明，中性樹脂封固。
（14）鏡檢。
2.植物染色步驟:
①標本的處理:固定，切成石蠟切片。
②粘片。
③脫蠟:二甲苯-50%二甲苯+50%乙醇- -100%乙醇- -95%乙醇- -85%乙醇- -70%乙醇- -50%乙醇- -30%乙醇- -水。
④入番紅0染色液染色。
⑤酸性乙醇分化液分化15s。
⑥脫色: 35%乙醇- -50%乙醇- -70%乙醇- -80%乙醇。
⑦水洗1min。
⑧入固綠染色液內浸染，蒸餾水洗1min。
⑨無水乙醇脫水3-5min,無水乙醇脫水，50%二 甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。
（10）樹脂封固。
染色結果:
(1)軟骨染色結果:
軟骨基質深紅色:軟骨細胞核藍色;細胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織呈灰綠色。
(2)植物染色結果:
木質化、木栓化的細胞壁染成紅色;纖維素細胞壁染成綠色:導管染成紅色，篩管染成綠色。
實驗技巧5:
(1)軟骨染色:
固綠與膠原纖維結合,不宜褪色，番紅o-固綠染色的分化很關鍵，分化過度容易導致切片不著色，分化不足易導致切片著色
過深。
(2)植物染色:
番紅染色后，在50%乙醇中脫色需經實踐,如果脫色不夠綠色會不好染;脫色過度會導致紅色過淡,甚至全部綠色。
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